期刊简介
本刊为中国解剖学会与广东省解剖学会联合主办，中山医科大学协办的全国性、综合性解剖学学术刊物，全国公开发行。以广大形态学工作者为主要读者对象，报道形态学领域领先的科研成果和教学改革经验。本刊欢迎人类学、人体解剖学、组织胚胎学、神经生物学、影像解剖学、病理解剖学、临床学科以及相关边缘学科的科研论著、综述、讲座、技术方法、教学经验、变异畸形及国内外学术动态等栏目的稿件。
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- 杂志名称：解剖学研究杂志
- 主管单位：广东省科学技术协会
- 主办单位：广东省解剖学会 中国解剖学会
- 国际刊号：1671-0770
- 国内刊号：44-1485/R
- 出版周期：双月刊
期刊荣誉：中国期刊全文数据库(CJFD)期刊收录：国家图书馆馆藏, 上海图书馆馆藏, 知网收录(中), 维普收录(中), 万方收录(中), CA 化学文摘(美)
正、反义β-1,4半乳糖基转移酶Ⅱ和Ⅴ地高辛标记RNA探针的制备和应用
龚蕾蕾；沈爱国；严美娟；何江虹；顾建新
关键词：β1, 4半乳糖基转移酶-Ⅱ和Ⅴ, RNA探针, 原位杂交, 荧光定量, 小鼠
摘要：目的为了探讨β1,4半乳糖基转移酶-Ⅱ和Ⅴ(β1,4-galactosyltransferase I,β-1,4-GalT-Ⅱ and Ⅴ)表达定位,本实验通过分子生物学手段,制备正、反义β-1,4-GalT-Ⅱ和Ⅴ地高辛标记的RNA原位杂交探针.方法设计引物,提取小鼠脑总RNA,通过RT-PCR方法,得到β-1,4-GalT-Ⅱ和Ⅴ基因序列,将其克隆到pGEM-T载体.根据其多克隆酶切位点和Sp6及T7位置,分别酶切后作为转录模板,通过Sp6及T7 RNA聚合酶,得到正、反义β-1,4-GalT-Ⅱ和Ⅴ地高辛标记的RNA原位杂交探针.检测标记探针的效价后,后通过原位杂交分析标记探针的特异性和杂交效果.结果本实验得到了高效价的正、反义β-1,4-GalT-Ⅱ和Ⅴ地高辛标记的RNA原位杂交探针,并表现出很好的杂交效果.结论正、反义β-1,4-GalT-Ⅱ和Ⅴ RNA原位杂交探针的制备,为进一步研究β-1,4-GalT-Ⅱ和Ⅴ在组织中的表达,尤其在神经组织的定位奠定基础.
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